长链非编码RNA LINC01224对肾癌细胞增殖和转移影响机制探讨

更新时间:2023-05-28

【摘要】目的长链非编码RNA(long-chain non-coding RNA,lncRNA)被发现在肾癌发生和发展调控方面具有重要作用。本研究观察lncRNA LINC01224在肾癌组织和细胞株中表达,探讨LINC01224对肾癌细胞增殖和转移影响及作用机制。方法实时荧光定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测肾癌组织14例和肾癌细胞株(Caki-1、ACHN、786-O、OS-RC-2和A498)中LINC01224表达。将载有LINC01224编码序列的慢病毒载体(Lenti-LINC01224)感染LINC01224表达量最低的肾癌细胞株作为观察组,以载有绿色荧光基因的慢病毒(Lenti-GFP)为对照组。细胞增殖实验和Transwell迁移实验检测感染后细胞增殖和迁移能力。生物信息学技术预测LINC01224的下游基因。qRT-PCR检测感染后细胞中LINC01224和下游基因mRNA表达。蛋白质印迹法检测下游蛋白表达。结果癌旁组织和肾癌组织LINC01224表达量分别为4.27±0.42和1.94±0.23,差异有统计学意义,t=4.826,P<0.001。人正常肾小管上皮细胞HK-2和人肾癌细胞株Caki-1、ACHN、786-O、OS-RC-2和A498中LINC01224表达量分别为6.95±0.73、2.74±0.38、4.73±0.48、4.76±0.28、1.04±0.16和3.09±0.35,差异有统计学意义,F=27.530,P<0.001。观察组细胞增殖能力从第3天开始降低,t=6.104,P=0.004。对照组和观察组OS-RC-2细胞迁移数分别为(191.50±31.15)和(71.12±16.52)个,差异有统计学意义,t=3.415,P=0.014。LINC01224可结合miR-542-3p,miR-542-3p可结合MFN2mRNA。与对照组比较,观察组OS-RC-2细胞测定指标表达量差异有统计学意义的包括:LINC01224表达量分别为1.03±0.15和7.93±0.80,t=8.511,P<0.001;miR-542-3p表达量分别为1.03±0.13和0.32±0.04,t=5.005,P=0.002;MFN2mRNA表达量分别为1.03±0.15和4.32±0.37,t=8.155,P<0.001。结论 LINC01224在肾癌中表达减少,可抑制肾癌细胞的增殖和迁移能力,其机制可能是抑制miR-542-3p的表达,减少miR-542-3p表达对MFN2基因抑制作用。

【关键词】 肾癌 长链非编码RNA 微小RNA 线粒体融合蛋白2

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